Лаборатория молекулярно-генетической диагностики

Количество просмотров: 8638

Сотрудники лаборатории:

• Врач лаборант Ивановичева Наталья Сергеевна
• Фельдшер-лаборант  Никитина Елена Алексеевна

Лаборатория занимается проведением ДНК-диагностики наследственных и инфекционных заболеваний. ДНК-диагностика объединяет несколько методов исследования, самый распространенный из них — метод ПЦР (полимеразной цепной реакции). Полимеразная цепная реакция – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того, как заболевание может себя проявить.

Инфекции, определяемые с помощью ПЦР-диагностики:

• вирусные гепатиты В, С;
• цитомегаловирусная инфекция;
• папилломавирусная инфекция (в том числе ее онкогенные виды);
• герпетическая инфекция;
• инфекции, передающиеся половым путем (уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз).

Материалом для проведения ПЦР-диагностики может служить:

соскоб эпителиальных клеток (соскоб из уретры у мужчин и у женщин, соскоб из цервикального канала); кровь, плазма, сыворотка крови; биологические жидкости (сок простаты, плевральная, спинномозговая, околоплодная, суставная жидкости, слюна); моча (используется первая порция утренней мочи) и др.

Правила подготовки к забору биологического материала для проведения

ПЦР-диагностики инфекций.

Для получения достоверных результатов анализы на выявление возбудителей бактериальных инфекций должны проводиться не менее чем через 2 недели после последнего приема антибиотиков/антибактериальных препаратов.

• Кровь следует сдавать натощак или через 5 часов после последнего приема пищи.
• Моча (первая порция) собирается утром, после тщательного туалета наружных половых органов.
• При взятии биоматериала из урогенитального тракта рекомендуется воздержаться от мочеиспускания и половых контактов в течение 2 часов перед взятием пробы. У женщин материал берется перед менструацией или через 1-2 дня после ее окончания.

Необходимо помнить, что результаты исследований на наличие инфекций зависят от периода инфицирования и состояния иммунной системы, поэтому отрицательный результат полностью не исключает наличия инфекции. В сомнительных случаях рекомендуется провести повторное исследование спустя 3-5 дней.

Диагностика наследственных заболеваний.

Генетика мужского бесплодия.

• Частые делеции в AZF локусе Y-хромосомы (AZFa, AZFb и AZFc).

Приблизительно у 5% мужчин репродуктивного возраста имеются различные отклонения количественных или качественных показателей спермы. При обнаружении олигозооспермии, азооспермии генетическая причина бесплодия присутствует в 30-50% случаев. Согласно письму МЗ РФ от 11 апреля 2003г. №2510/3797-03-32, для выявления генетических факторов мужского бесплодия рекомендуется генетическая диагностика. Наиболее частым генетическим фактором являются делеции Y-хромосомы в регионе AZF (фактор азооспермии). У мужчин с делециями локуса AZF есть вероятность прогрессирования нарушений сперматогенеза с возрастом (от олигозооспермии до азооспермии). Делеции локуса AZF будут передаваться всем рожденным мальчикам, поэтому будущим родителям надо знать, что у сыновей возникнут те же проблемы что и у их отцов.

Локус AZF разделен на 3 участка: AZFa, AZFb и AZFc. В каждом из них идентифицированы гены, участвующие в контроле сперматогенеза. Делеции в локусе AZF могут быть полными, т.е. целиком удаляющими один из AZF-регионов или более, и частичными, когда они не полностью захватывают какой-либо из трех его регионов.

При полных AZF-делециях прослеживается довольно четкая зависимость степени нарушения сперматогенеза от размера и локализации делеций, что может иметь прогностическое значение в получении сперматозоидов, пригодных для программ экстракорпорального оплодотворения.

• Наиболее частые мутации в гене муковисцидоза CFTR (F508del, G542X, W1282X, N1303K, 2143delT, 2184insA, 3849+10kbC>T, dele2.3(21kb).

Предрасположенность к привычному невынашиванию беременности на ранних сроках.

• Анализ полиморфизмов в генах фолатного цикла (MTHFR, MTR, MTRR)
• Анализ полиморфизмов в генах факторов свертывающей системы (F2, F5, F7, F13A1, FGB, ITGA2, ITGA3, PAL-1)/
• Типирование супружеской пары по трем генам гистосовместимости HLA II класса (DQ A1, DQ B1, DR B1).

Предрасположенность к изолированным порокам развития плода.

• Анализ полиморфизмов в генах фолатного цикла (MTHFR, MTR, MTRR)

Типирование генов гистосовместимости (HLA) II класса

К генам HLA (human leucocyte antigens, антигены лейкоцитов человека) II класса относятся 24 гена, белковые продукты которых относятся к главному комплексу гистосовместимости. Они играют важную роль в регуляции распознавания чужеродных агентов и являются необходимыми участниками многих иммунологических реакций. Из всех генов HLA II класса наибольшее значение имеют 3 гена: DQA1, DQB1, DRB1.

Типирование генов HLA II класса применяется для диагностики бесплодия и невынашивания беременности. Для проведения HLA типирования оба супруга должны сдать кровь из вены (натощак или через 5 часов после приема пищи). Кровь можно сдать процедурном кабинете МГК с 8.00 до 15.00 .  Из венозной крови выделяются лейкоциты. На их поверхности располагаются молекулы белка – антигены главного комплекса гистосовместимости (HLA – антигены). Набор антигенов каждого человека уникален. Полное несовпадение HLA – генотипов у супругов является благоприятным для развития беременности. Если по результатам обследования были выявлены совпадения, которые врач счел угрозой для зачатия и вынашивания беременности, он назначит паре соответствующее лечение.

Тромбофилии

Тромбофилии – это изменение баланса свертывающей системы крови, проявляющееся повышенной склонностью к процессу тромбообразования. Тромбофилия характеризуется длительным течением и внезапным проявлением осложнений (флеботромбоз, тромбоэмболия).

У любого человека могут появиться признаки тромбофилии, но степень их проявления будет различной в зависимости от наличия совокупности факторов риска данной патологии.

Все тромбофилии разделяют на две основные группы: наследственные и приобретенные.

Приобретенные факторы редко становятся первопричиной тромбофилии

Наследственная или врожденная тромбофилия вызвана мутацией одной или обеих копий генов, кодирующих факторы свертывающей или противосвертывающей систем.

К наследственным факторам риска развития тромбофилии относятся: недостаток антитромбина III, дефицит протромбинов S и С, мутация генов фактора V и протромбина, дисфибриногенемия, повышенный уровень липопротеидов крови, серповидно-клеточная анемия и талассемия.